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細(xì)胞劃痕

細(xì)胞劃痕

概念:

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)(僅適用于貼壁細(xì)胞)通過劃破細(xì)胞單層,創(chuàng)造一個(gè)細(xì)胞空隙,以觀察和評(píng)估細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和遷移的能力。

原理與方法:

在六孔板底部用馬克筆和直尺均勻地畫三條橫線;細(xì)胞培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,用胰酶消化細(xì)胞,制備單細(xì)胞懸液,接種到六孔板中。細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度90%時(shí),用10μL槍頭沿著六孔板底部的橫線做均勻的劃痕。用 PBS 緩沖液清洗3次,去除劃下的細(xì)胞,注意防止脫落細(xì)胞進(jìn)入劃痕內(nèi)影響統(tǒng)計(jì)。擦掉馬克筆畫線;六孔板中加入含2%血清的培養(yǎng)基,在顯微鏡下白光拍照,記錄0h細(xì)胞劃痕寬度。培養(yǎng)不同時(shí)間長(zhǎng)度后進(jìn)行白光拍照,記錄細(xì)胞劃痕寬度,進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。


                                                               細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)