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概念：

Transwell小室通過模擬細(xì)胞穿越基底膜的行為，來(lái)研究細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)性。Transwell小室由一個(gè)多孔的聚碳酸酯膜和上下兩個(gè)室組成。在一個(gè)杯子中間置入一層多孔隔斷而分成上下兩層。細(xì)胞被接種在上室，而下室包含誘導(dǎo)細(xì)胞遷移的成分，可以是另一種細(xì)胞也可以是人為添加趨化因子等。隨后，細(xì)胞通過膜上的孔隙遷移到下室，

可研究處理因素對(duì)目的細(xì)胞的遷移和侵襲能力的影響，以及細(xì)胞間相互作用等對(duì)細(xì)胞遷移和侵襲的影響。

原理與方法：

取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行饑餓處理約24h。準(zhǔn)備Transwell小室，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇是否添加基質(zhì)膠包被。將處理好的細(xì)胞消化重懸，用無(wú)血清培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度至適當(dāng)密度。在下室加入適量的誘導(dǎo)劑（血清）接種細(xì)胞，并將細(xì)胞懸液加入Transwell上室。將Transwell小室放回培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24-48h。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用4%多聚甲醛固定后用PBS洗滌小室1次；結(jié)晶紫染色10min，隨后用PBS洗滌2-3次。顯微鏡下隨機(jī)選取若干視野，計(jì)數(shù)遷移到膜下側(cè)的細(xì)胞數(shù)量。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量計(jì)算細(xì)胞遷移或侵襲的百分率。

                                                     Transwell遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)