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平板克隆

平板克隆

概念:

克隆是指體細(xì)胞無性繁殖,進(jìn)行種群繁殖并擴(kuò)大的過程。是模擬體內(nèi)成瘤的體外實(shí)驗(yàn),克隆形成率可以反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個(gè)重要性狀。

原理與方法:

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞以1000-4000個(gè)/孔的密度接種于6孔板;于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7-14天左右。棄去培養(yǎng)基,PBS洗滌細(xì)胞,4%多聚甲醛固定細(xì)胞20min;棄去多聚甲醛,用0.2%結(jié)晶紫染色5min后用自來水洗滌細(xì)胞,晾干,相機(jī)拍照。計(jì)算克隆形成率,克隆形成率=克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)*100%。


                                                平板克隆形成實(shí)驗(yàn)